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培养基实验推荐:检验微生物的培养特征

2020-01-09 11:54 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂
    我们在说到培养基的时候常常能够与微生物到一起,也有朋友问到它们之间有什么关系。它是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,我们今天来看一个新的实验推荐,检验微生物的培养特征。

1、斜面接种
    ① 在肉膏蛋白胨斜面试管上,用记号笔写上将接种的菌名、日期和接种者。
    ② 点燃酒精灯或煤气灯。
    ③ 将菌种试管和待接种的斜面试管,用大拇指和食指、中指、无名指握在左手中,并将中指夹在两试管之间,使斜面向上,成水平状态。在火焰边用右手松动试管塞,以利于接种时拔出。
    ④ 右手拿接种环通过火焰烧灼灭菌,在火焰边用右手的手掌边缘和小指,小指和无名指分别夹持棉塞,将其取出,并迅速烧灼管口。
    ⑤ 将灭菌的接种环伸入菌种试管内,先将环接触试管内壁或未长菌的培养基,达到冷却的目的,然后再挑取少许菌苔。将接种环退出菌种试管,迅速伸入待接种的斜面试管,用环在斜面上自试管底部向上端轻轻地划直线,勿将培养基划破,也不要使环接触管壁或管口。
    ⑥ 接种环退出斜面试管,再用火焰烧管口,并在火焰边将试管塞塞上。将接种环逐渐接近火焰,再烧灼。如果接种环上沾的菌体较多时,应先将环在火焰边烤干,然后烧灼,以免未烧死的菌种飞溅出污染环境,接种病原菌时更要注意此点。

2、液体培养基接种
    向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同,不同之处是挑取菌体的接种环放入液体培养基后,应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦,使菌体从环上脱落,混进液体培养基,塞好试管塞后,摇动液体,使菌体在液体中分布均匀,或用试管振荡器混匀。
    向液体培养基中接种量大或要求定量接种时,可将无菌水或液体培养基注入菌种试管,用接种环将菌苔刮下,再将菌种悬液以无菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物,则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。整个接种过程都要求无菌操作。

3、穿刺接种
    用接种针挑取菌种(针必须挺直),自培养基的中心垂直地刺入半固体培养基中,直至接近管底,但不要穿透,然后沿原穿刺线将针拔出,塞上试管塞,烧灼接种针。

4、将已接种的斜面、液体和半固体培养基放置28-30℃温箱,培养2-3天后取出观察结果。
    以上是本次实验的过程步骤,我们下面来了解一下实验的原理是什么,生长在液体培养基内,可以呈混浊、絮状、粘液状、形成菌膜、上层清晰而底部显沉淀状。穿刺培养在半固体培养基中,可以沿接种线向四周蔓延;或仅沿线生长;也可上层生长得好,甚至连成一片,底部很少生长;或底部长得好,上层甚至不生长。利用微生物的培养特征,可以作为它们的种类鉴定和识别纯培养是否污染的参考。检验微生物的培养特征,或进行其他微生物学实验时,接种过程必须保证不被其他微生物所污染,为此,除工作环境要求尽可能地避免或减少杂菌污染外,熟练地掌握各种无菌操作接种技术是很重要的。
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